Kapillärelektrofores i två dimensioner - slutrapport från Innovationsprojekt I4215
Publiceringsdatum: 2005-01-01
Rapportnummer: FOI-R--1778--SE
Sidor: 30
Skriven på: Svenska
Nyckelord:
- Tvådimensionell separation
- kapillärelektrofores
- vätskekromatografi
- masspektrometri
- Ricinus communis
- ricin
Sammanfattning
Vid analys av komplex proteinprover används ofta tvådimensionell gelelektrofores. Det är en tidskrävande och instrumentkrävande teknik som innefattar många manuella moment. Genom att istället använda kapillärbaserade separationstekniker i tvådimensionell kombination kan provmängderna minskas, analystiderna kortas och de manuella momenten reduceras första dimensionen sker med kapillär isolektrisk fokusering där proteinernasepareras efter deras pI. De separerade och fokuserade proteinerna överförs sedan till den andra dimensionen via en enzymkolonn där de klyvs till peptider. I den andra dimensionen sker vätskekromatografi på de resulterande peptiderna och genom masspektrometri kan sedan peptiderna och därmed de ursprungliga proteinerna identifieras. Den här tvådimensionella kombinationen kommer att kunna användas både för analys av komplexa proteinprover och som ett verktyg för att nå detaljerad information om toxinet ricin.